Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Variant génu MicroRNA-499a (rs3746444A/G) a náchylnosť na konečné štádium ochorenia obličiek spojeného s cukrovkou 2.

MANAL S. FAWZY a kol

Abstraktné

Diabetická nefropatia (DN) je hlavným rizikovým faktorom v konečnom štádiuobličkovéchoroba(ESRD). MikroRNA (miRNA/miR) a ich varianty sa môžu podieľať na zdraví a chorobe, vrátane DN. Táto štúdia bola zameraná na skúmanie asociácie miRNA-499a génu (MIR499A) variantu oblasti semien A/G (rs3746444) s DN-asociovaným ESRD(koncovej fázeobličkovéchoroba)citlivosť u pacientov s diabetes mellitus a určiť, či existuje súvislosť medzi rôznymi genotypmi a laboratórnymi a klinickými údajmi pacientov. Uskutočnila sa pilotná štúdia prípadovej kontroly na 180 dospelých pacientoch s diabetes mellitus 2. typu. Celkovo 90 pacientov s ESRD (koncovej fázeobličkovéchoroba)na pravidelnej hemodialýze boli považované za prípady a 90 diabetických pacientov s normoalbuminúriou rovnakého veku, pohlavia a etnickej príslušnosti bolo považovaných za kontroly. Genotypizácia MIR499A sa uskutočnila pomocou testu rozlišovania alel TaqMan v reálnom čase. Výsledky ukázali, že variant MIR499A rs3746444*G udelil náchylnosť k rozvoju ESRD pod kodominantným [(pomer pravdepodobnosti (95-percentný interval spoľahlivosti): 2,49 (1,41-3,89) a 2,41 (1,61-6,68) pre porovnanie heterozygotov, homozygotov v uvedenom poradí], dominantné [2,30 (1,18-3,90)] a alelické [1,82 (1,17-2,83)] modely Rozdielne genotypy špecifikovaného variantu nevykazovali signifikantné asociácie s klinicko-laboratórnymi údajmi študovaných pacientov ani s cirkulujúcim miR‑ Plazmatické hladiny 499a. Na záver, výsledky tejto štúdie naznačujú, že MIR499A rs3746444 môže byť variantom citlivosti na ESRD súvisiace s DN v študovanej populácii. Na overenie týchto zistení sú však potrebné štúdie s väčším počtom vzoriek s rôznymi etnikami.

Cistanche dokáže liečiťobličkovéchoroba

Úvod

Konečné štádium spojené s diabetickou nefropatiou (DN).obličkovéchoroba(ESRD) je celosvetovo rastúcim problémom verejného zdravia (1). Za posledné tri desaťročia ESRD spojené s DN(koncovej fázeobličkovéchoroba) has been identified as a major cause for dialysis in several countries, including Saudi Arabia, in which type 2 diabetes mellitus (T2DM) accounts for >33 percent všetkých prípadov ESRD (1,2). Niekoľko sľubných štúdií identifikovalo gény spojené s výskytom a progresiou DN, vrátane génov spojených s mikroRNA (miRNA/miR) (3,4). Táto rodina nekódujúcich RNA je vysoko konzervovaná, tkanivovo špecifická a má krátku dĺžku (20-24 nukleotidov). miRNA hrajú kľúčovú úlohu v mnohých fyziologických a patologických stavoch v ľudských orgánoch, vrátaneobličky. Napríklad upregulácia miR-192, miR-194, miR-204, miR-215 a miR-216 a downregulácia miR-133a, miR-133b, miR-1d, miR-296, miR-1a, miR -122 a miR-124a boli pozorované u ľudíobličky(5). Tiež sa uvádza, že miR-192 je 20-krát vyšší exprimovaný v kortikálnej kôreobličkytkaniva v porovnaní s medulárnouobličkytkaniva, kde sa podieľa na regulácii transportu sodíka; okrem toho miR‑155 mohol potlačiť expresiu receptora angiotenzínu II typu 1, čo by mohlo ovplyvniť krvný tlak (5,6). Väzbou na mRNA ciele majú miRNA schopnosť spôsobiť translačnú represiu, destabilizáciu mRNA a/alebo degradáciu (7). Termodynamika cieľových interakcií miRNA-mRNA môže byť ovplyvnená jednonukleotidovými polymorfizmami (SNP), ktoré sa vyskytujú v prekurzorovej miRNA (pre-miRNA), čo vedie k dysregulácii cieľového génu a následne k variáciám fenotypu alebo náchylnosti na ochorenie (8). Gén miRNA-499a (MIR499A) sa nachádza v géne srdcového svalu ťažkého reťazca 7B ľudského myozínu na chromozóme 20q11.22 34990376-34990497 ( plus ) a pozostáva z jedného exónu, ktorý kóduje jeden transkript (MI0003183). Má dĺžku 122 párov báz a uvádza sa, že je markerom poškodenia kardiomyocytov (9). Hoci počet štúdií zameraných na presnú úlohu miR-499a v patogenéze a vývoji ESRD v dôsledku DN je obmedzený, bolo navrhnuté, aby miR-499a ovplyvnil niekoľko biologických procesov, ako je bunková senescencia, zápal, apoptóza a imunitný systém. odpoveď (10), ktorá môže hrať úlohu v biogenéze ESRD (tabuľka SI) (11-14). Okrem toho sa už skôr uvádzalo, že upregulácia miR-499a môže regulovať inzulínovú rezistenciu, glykogenézu a modulovať inzulínovú signalizáciu inhibíciou homológu fosfatázy a tenzínu (15).

Uvádza sa, že bežný variant (rs3746444), ktorý sa nachádza v oblasti semien miR-499a-3p AC(A/G)UCAC na pozícii 20:34 990 448 (GRCh38), je spojený s niekoľkými chorobami, najmä na Blízkom východe. populácie, ako sú kardiovaskulárne ochorenia (9), autoimunitné ochorenia (16) a rakovina (17). V našej predchádzajúcej štúdii bola v súčasnom ESRD spojená s DM identifikovaná významná dysregulácia hladín miR-499a v obehu(koncovej fázeobličkovéchoroba)kohorta (18). Cieľom tejto štúdie bolo preto preskúmať asociáciu variantu oblasti semien MIR499A(A/G) (rs3746444) s citlivosťou ESRD spojenou s DN u pacientov s T2DM a určiť, či existuje asociácia medzi rôznymi genotypmi a pacientmi. klinicko-laboratórne údaje. Podľa našich najlepších vedomostí ide o prvú štúdiu, ktorá skúmala potenciálnu súvislosť špecifikovaného variantu s citlivosťou na ESRD vo vzorke pacientov na Blízkom východe.

Materiály a metódy

Študijná populácia.

Celkovo 90 po sebe nasledujúcich pacientov s ESRD súvisiacim s T2DM(koncovej fázeobličkovéchoroba)na pravidelnej hemodialýze (trikrát/týždeň) boli vybraní ako skupina pacientov v tejto štúdii. Pacienti navštevovali nefrologické centrum Mohammeda bin Sauda Al-Kabeera na renálnu dialýzu v centrálnej nemocnici Arar (Arar, Saudská Arábia). Kritériá zahrnutia/vylúčenia pre výber skupiny pacientov s ESRD boli podrobne opísané v našej predchádzajúcej práci na rovnakom ESRD(koncovej fázeobličkovéchoroba)kohorta pacientov (18). Pacienti s akýmkoľvek chronickým ochorením, autoimunitnými poruchami, rakovinou aobličkovéchorobainá ako nefropatia spojená s DM (diagnostikovaná renálnou biopsiou podľa lokálnych štandardných protokolov prevzatých z medzinárodných štandardov pre diagnostiku nediabetickýchobličkovéchoroba) (19) boli vylúčené. Pretože je vysoko pravdepodobné, že nakoniec sa u významnej časti pacientov s včasnou diagnózou diabetu vyvinie ESRD(koncovej fázeobličkovéchoroba), pacienti s T2DM so zodpovedajúcim trvaním diabetu a normoalbuminúrie (pomer albumín/kreatinín v moči,<30 µg/mg)="" (20,21)="" were="" considered="" as="" the="" control="" group.="" all="" biomedical="" research="" involving="" human="" participants="" conformed="" to="" the="" guidelines="" of="" the="" helsinki="" declaration.="" the="" protocol="" of="" the="" present="" study="" was="" approved="" by="" the="" research="" ethics="" committees="" of="" northern="" border="" university="" (approval="" no.="" 6/340/h),="" and="" written="" informed="" consent="" was="" obtained="" from="" all="">

Cistanche dokáže liečiťobličkovéchoroba

Laboratórna analýza.

Vzorky žíl nalačno sa odoberali do obyčajných a vákuových skúmaviek s kyselinou etyléndiamíntetraoctovou pred špecifikovanou druhou dialýzou pre pacientov s ESRD(koncovej fázeobličkovéchoroba). Sérum sa oddelilo 12 minútovou centrifugáciou pri 1300 xg pri teplote miestnosti, ihneď z bývalej skúmavky na biochemickú analýzu s použitím komerčne dostupných súprav pre glukózu (kat. č. 44044831190),obličkyfunkčné testy [kreati-nine (kat. č. 4810716190) a močovina (kat. č. 4460715190)] a profilovanie lipidov [celkový cholesterol (kat. č. 3039773190), triacyl-glycerol (kat. č. 20767107322), HDL- c (kat. č. 7528566190) a LDL‑c (kat. č. 7005717190)] na biochemickom analyzátore Cobas Integra (všetky Roche Diagnostics GmbH).

Genotypizácia pre MIR499A (rs3746444). Genomická DNA bola extrahovaná z celej krvi pomocou súpravy Wizard Genomic DNA Purification Kit (kat. č. A1120; Promega Corporation) podľa protokolu výrobcu, po čom nasledovalo vyhodnotenie koncentrácie a čistoty DNA pomocou spektrofotometra NanoDrop ND‑1000 (NanoDrop Technologies; Thermo Fisher Scientific, Inc.) a elektroforézou na agarózovom géli (2 percentá) na posúdenie integrity DNA. Vzorky sa následne skladovali pri -20 °C až do doby genotypizácie. Test polymorfizmu MIR499A (rs3746444, ID testu: C_2142612_30) ​​sa uskutočnil pomocou PCR v reálnom čase na rozlišovanie alel TaqMan s kvalitatívnymi opatreniami, ako je opísané vyššie (16). Stručne povedané, PCR prebiehala v 25 µl reakčnom objeme obsahujúcom gDNA (20 ng) zriedenom na 11,25 µl vodou bez nukleáz, 12,5 µl TaqMan Universal PCR Master Mix (2X) a 1,25 µl 20 x TaqMan SNP Assay poskytnutej z rovnaký dodávateľ. Vzorky enzýmu bez šablóny a bez polymerázy sa uskutočnili zakaždým so vzorkami štúdie ako negatívnymi kontrolami. Genotypizácia sa uskutočňovala spôsobom zaslepeným voči stavu prípad/kontrola. PCR amplifikácia sa uskutočnila na StepOne Real-Time PCR System (Applied Biosystems; Thermo Fisher Scientific, Inc.), s použitím nasledujúcich podmienok: Dvojfázové počiatočné zadržanie (2 minúty pri 50 °C a 10 minút pri 95 °C) , po ktorej nasleduje 40-cyklová dvojkroková PCR (denaturácia počas 15 sekúnd pri 95 °C a žíhanie/predĺženie počas 1 minúty pri 60 °C). Alelická diskriminácia sa určila analýzou súborov s fluorescenčnými údajmi z každého cyklu s použitím softvéru na automatické volanie alely (SDS verzia 1.3.1; Applied Biosystems; Thermo Fisher Scientific, Inc.; Obr. S1). Celková miera volania genotypu bola 100 percent.

Štatistická analýza.

Výpočty veľkosti vzorky a výkonu pomocou softvéru G power-3 (http://www.gpower.hhu.de/) ukázali, že pri špecifikovanom dizajne štúdie je prípustná chybovosť, chyba=0.05 stredný účinok veľkosť=0.5 a veľkosť vzorky 90/skupina môžu poskytnúť 91 percentnú silu štúdie. Distribúcia údajov a homogenita rozptylu boli hodnotené Shapiro-Wilkovým testom a Leveneovým testom. Priebežné údaje sú vyjadrené ako priemer ± štandardná odchýlka a kategorické premenné sú prezentované ako počet frekvencií. Údaje sa porovnávali pomocou χ2 testu, zatiaľ čo na porovnanie spojitých premenných sa použili nepárový Studentov t-test, jednosmerný test ANOVA alebo Kruskal-Wallisov test. Odchýlka distribúcie pozorovaného genotypu od Hardy-Weinbergovej rovnováhy sa analyzovala pomocou χ2 dobrej zhody s použitím Online Encyclopedia for Genetic Epidemiology (http://www.oege.org/). Genotypovo špecifické upravené pomery šancí (OR) a 95-percentné intervaly spoľahlivosti (CI) boli vypočítané pre rôzne genetické modely. Upravili sa premenné štúdie, vrátane veku, pohlavia, počtu hemodialýz, prítomnosti hypertenzie a trvania ochorenia. P<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="" difference.="" spss="" version="" 23="" (ibm="" corp.)="" was="" used="" for="" the="" statistical="">

MIR499A (rs3746444) variant in silico analýza.

MIR499A (rs3746444) variant in silico analýza. Štrukturálna a funkčná analýza génov sa uskutočnila pomocou databázy Ensembl Genomic (ensembl.org) a miRBase.org; predikcia cieľa bola vykonaná pomocou DIANA‑micro T‑CDS v5.0 (http://diana.imis.athena innovation.gr/DianaTools/index.php?r=microT_ CDS/index), miRBase (http://www.mirbase.org/) a algoritmus DIANA-TarBase v7.{7}} (http://diana.imis.athena-innovation.gr/DianaTools/index.php ?r=tarbase/index) databázy; a analýza zhlukovania anotácií a analýzy obohatenia dráhy sa uskutočnili pomocou miRPath v3.{10}} (http://www.microrna.gr/miRPathv3) a všetky boli podrobne popísané v našich predchádzajúcich štúdiách (8,12). Predpokladané ciele miR‑499a sa porovnávali s prítomnosťou alel A aj G pomocou programu miR2Go (http://compbio.uthsc.edu/miR2GO) na strednej hierarchickej úrovni filtrovania (P<>

Výsledky

Charakteristika skúmanej populácie.

Základné charakteristiky subjektov štúdie sú zhrnuté v tabuľke I. Priemerný vek pacientov s ESRD(koncovej fázeobličkovéchoroba)bola 46,6±12,3 rokov u mužov a 47.0±14,7 rokov u žien. Priemerná dĺžka trvania dialýzy bola porovnateľná pre obe pohlavia u účastníkov štúdie. V klinických a biochemických charakteristikách účastníkov neboli žiadne rozdiely špecifické pre pohlavie, s výnimkou tých, ktoré sú spojené s parametrami lipidového profilu, ktoré boli horšie u pacientok v porovnaní s mužmi (tabuľka I).

Variant MIR499A (rs3746444) v populácii štúdie.

V študovanej populácii genotypové frekvencie MIR499A (rs3746444) SNP sledovali Hardy-Weinbergovu rovnováhu (P=0.149 u kontrol a P=0.398 hospitalizovaných pacientov). Frekvencie vedľajších alel pre rs3746444*G boli 0.28 a 0.42 u kontrol a pacientov s ESRD(koncovej fázeobličkovéchoroba), resp. Medzi študijnými skupinami bol pozorovaný významný rozdiel v genotypoch MIR499A. Frekvencia genotypu GG bola 11,1 percenta u kontrol, v porovnaní s 20 percentami u pacientov s ESRD(koncovej fázeobličkovéchoroba)(P=0.030). Nosenie alely rs3746444*G poskytlo takmer 2-násobné zvýšenie náchylnosti na rozvoj ESRD(koncovej fázeobličkovéchoroba)s OR (95 percent CI) 1,82 (1,17-2,83) podľa alelického genetického asociačného modelu. V súlade s tým mali homozygotní/heterozygotní jedinci (rs3746444*GG/AG) väčšiu pravdepodobnosť vzniku ESRD pri porovnaní homozygotov/heterozygotov a dominantných modelov [GG vs. AA: OR=2.41, 95 percent CI: 1,61‑6,68 ; AG vs. AA: OR=2 0,49, 95 percent CI: 1,41–3,89; (AG plus GG) vs. AA: OR=2 0,30, 95 percent CI: 1,18–3,90; Tabuľka II].

Variant MIR499A (rs3746444) a klinicko-laboratórne charakteristiky pacientov s ESRD(koncovej fázeobličkovéchoroba). Pri skúmaní asociácie medzi rôznymi genotypmi špecifikovaného variantu a klinickými a biochemickými charakteristikami skupiny pacientov sa nepreukázali žiadne významné asociácie, ako je uvedené v tabuľke III.

Účinok MIR499A (rs3746444) na štruktúru a funkciu génu.

Hoci miR-499a tvorí sekundárnu vlásenkovú slučku s komplementárnymi sekvenciami vo svojej štruktúre (obr. S2), predpovedalo sa, že rôzne gény budú zamerané na obe zrelé formy syntetizované z oboch ramien. Predpokladalo sa, že celkovo 1 890 génov bude ovplyvnených miR-499a (919 génov 3p, 810 5p a 161 génov oboma), ako už bolo podrobne uvedené (8). Najvýznamnejšie cesty kjótskej encyklopédie génov a genómov (KEGG) spojené s cieľmi miR-499a, ktoré sa môžu podieľať na progresii DN do ESRD(koncovej fázeobličkovéchoroba)sú zhrnuté v tabuľke IV.

Prítomnosť rs3746444 SNP v oblasti semena cestujúceho vlákna miR-499a môže viesť k narušeniu cieľov a vytvoreniu odlišného súboru génov (8, 16). Môže tiež skrátiť štruktúru stonky a slučky; teda ovplyvňuje spracovanie celej miRNA.

Naša predchádzajúca štúdia uvádzala dysreguláciu hladín miR-499a v obehu v tej istej kohorte pacientov (18); preto sa táto štúdia zamerala na určenie, či tieto obehové hladiny vykazovali významné variácie medzi rôznymi genotypmi toho istého génu. Zistenia však neodhalili významné súvislosti medzi rôznymi genotypmi MIR499A (rs3746444) a hladinami cirkulujúceho miR-499a v plazme zistenými predtým pomocou metódy Livak (22) (P=0.173; Obr. 1) .

Cistanche dokáže liečiťobličkovéchoroba

Diskusia

Uvádza sa, že SNP sú najbežnejším typom genetickej variácie spojenej s diverzitou populácie, náchylnosťou na ochorenie a individuálnymi terapeutickými odpoveďami (23). SNP môžu ovplyvniť expresiu a/alebo dozrievanie miRNA na úrovni transkripcie primárneho transkriptu, post-transkripčné spracovanie primárnych transkriptov alebo pre-miRNA alebo ovplyvňovanie interakcií miRNA-mRNA (24).

Táto štúdia preukázala, že prenášanie alely rs3746444*G poskytuje náchylnosť na ESRD(koncovej fázeobličkovéchoroba)in patients with DM compared with non‑carriers under the allelic, co‑dominant, and dominant genetic association models. Results of our previous study demonstrated that the rs3746444 polymorphism results in an A>G nesúlad v miR-499a prekurzorovej kmeňovej oblasti (umiestnený oproti zrelej sekvencii), ovplyvňujúci zrelú miR-499a-3p oblasť semien, ktorá sa podieľa na správnej väzbe miRNA-mRNA, s následným narušením a vytvorením niekoľkých cieľov (8). Nositelia homozygotných genotypov (AA alebo GG) poskytujú dve zrelé formy, miR-499a-5p a miR-499a-3p*A alebo *G, pričom každá má svoj špecifický panel cieľových génov. Na porovnanie, heterozygotní (AG) nosiči produkujú tri zrelé formy, miR-499a-5p, -3p*A a -3p*G, s tromi podskupinami cieľových génov. Analýzy v kremíku tejto štúdie odhalili, že prítomnosť týchto rôznych alel môže narušiť a vytvoriť 667 a 744 génových cieľov. Medzi overené génové ciele, ktoré boli skúmané, patrí nukleárny proteín 4, proteín-1 interagujúci s jadrovým receptorom, proteín podobný Bcl-2-like proteínu 14, chemokínový (C-C motív) ligand 8 a oblasť Y-box 4 určujúca pohlavie (20) . Podľa našich najlepších vedomostí ide o prvú štúdiu, ktorá skúmala variant MIR499A rs3746444 na citlivosť na ESRD u pacientov s DM vo vzorke populácie Stredného východu. V súlade so zisteniami tejto štúdie Misra et al (25) uviedli, že heterozygotné a homozygotné genotypy MIR-499A rs3746444 poskytujú riziko rozvoja ESRD, ktorý bol vyvolaný inými poruchami okrem DN, a môžu byť spojené s takmer 3-násobne zvýšené riziko akútneho odmietnutia aloštepu v severoindickej populácii (25).

Vzhľadom na to, že SNP v pre-miRNA môžu meniť spracovanie a / alebo expresiu miRNA, pri analýze asociácie polymorfizmu MIR499A s cirkulujúcimi plazmatickými hladinami miR-499a a rôznymi klinicko-laboratórnymi charakteristikami pacientov neboli pozorované žiadne významné asociácie, ako už bolo opísané. Predpokladá sa, že prítomnosť variantu miR-499a môže ovplyvniť termodynamiku interakcií RNA-RNA a afinitu tejto miRNA interferenciou s optimálnou väzbou na cieľové mRNA, čo vedie k dysregulácii cieľových génov, ktoré sprostredkovávajú náchylnosť na ochorenie. ESRD(koncovej fázeobličkovéchoroba)bez ovplyvnenia relatívnej expresie a/alebo fenotypu ochorenia (22). Analýzy in silico tejto štúdie odhalili niektoré z hlavných významných KEGG ciest zahŕňajúcich ciele miR-499a, ktoré sa môžu podieľať na progresii DN do ESRD (26-32). Napríklad dráha (TGF‑1) sa podieľala na etiopatológii DN (26,28). Dráha TGF‑1 aktivuje kľúčové signálne dráhy vrátane dráhy PI3K/AKT, ktorá sprostredkováva fosforyláciu a inaktiváciu transkripčného FOXO, čo vedie k oxidačnému stresu, expanzii mezangiálnych buniek a akumulácii proteínov extracelulárnej matrice, kľúčových zložiek chronických ochorení spojených s DN.obličkychoroba (26). Upregulácia aktivity tyrozínkinázy receptora epidermálneho rastového faktora (ErbB) je dôležitá pri sprostredkovaní niekoľkých komplikácií diabetu, vrátane obličkových patológií, srdcovej fibrózy a vaskulárnej dysfunkcie (29). Okrem toho bola evidentná úloha dráhy TNF v progresii DN u diabetických myší a potkaních modelov. Napríklad sa uvádza, že použitie rozpustného fúzneho proteínu TNF receptor-2 zlepšuje skoré štádium DN v modeli DM KK-Ay myši (30). Tiež sa zistilo, že inhibítor TNFR-Fc TNF zmierňuje renálnu hypertrofiu bez ovplyvnenia metabolického profilu u potkanov s indukovaným diabetom (31). mTOR sa podieľa na udržiavaní funkcie glomerulárnych podocytov; zvýšená aktivita prispela k glomerulárnej hypertrofii a hyperfiltrácii spojenej s progresívnou DN (32).

Pozoruhodné je, že na vyššie uvedené cesty sa zamerali mnohé experimentálne výskumy na potvrdenie ich terapeutického významu v DN (29, 30, 33, 34). Ziyadeh et al (33) uviedli zlepšenie v rýchlosti glomerulárnej filtrácie indukovanej monoklonálnou anti-TGF- protilátkou u db/db diabetických myší (33). Okrem toho sa uvádza, že dlhodobá liečba streptozotocínom indukovaných diabetických potkanov pomocou AG825, špecifického inhibítora receptorovej tyrozín-proteínkinázy ErbB-2, významne koriguje hyperreaktivitu perfundovaného mezenterického vaskulárneho riečiska na norepinefrín a oslabenú reakciu na karbachol (29). Inhibícia TNF‑ fúznym proteínom solubilného TNF receptora (TNFR)2, etanerceptom, zlepšila progresiu skorého štádia DN v diabetickom modeli založenom na myšiach KK‑A(y), najmä inhibíciou protizápalových pôsobenie renálnej TNF‑‑TNFR2 dráhy (30). Okrem toho rapamycín, prvá hlásená zlúčenina, ktorá inhibuje mTOR, inhibuje glukózou indukovanú fosforyláciu kinázy p70S6 a jej substrátu, ribozomálneho proteínu S6, v mezangiálnych bunkách, čím zmierňuje morfologické a funkčné poruchy diabetických pacientov.obličkyna myšom modeli T2DM (34).

V súlade so zisteniami tejto štúdie Ciccacci et al (35) odhalili zapojenie miR‑499a do citlivosti DN v talianskej kohorte T2DM (35). Výsledky vyššie uvedenej štúdie odhalili, že toto spojenie bolo spôsobené vplyvom miR-499a na dvoch apoptotických hráčov, kalcineurín a proteín súvisiaci s dynamínom, čím dysregulácia miR-499a spôsobila mitochondriálnu dysfunkciu a bunkovú apoptózu, čo mohlo prispieť k náchylnosti na ochorenie (33). Predovšetkým posledné uvedené procesy sa podieľajú na DN (36, 37), čo môže čiastočne podporovať spojenie variantu miR-499a s ESRD(koncovej fázeobličkovéchoroba)náchylnosť v súčasnej kohorte. Na potvrdenie zistení tejto štúdie je však potrebný rastúci počet štúdií zahŕňajúcich väčšie nezávislé kohorty s rôznymi etnikami

Na záver, podľa našich najlepších vedomostí, táto štúdia bola prvou, ktorá navrhla vplyv variantu oblasti semien MIR499A A/G (rs3746444) na ESRD spojené s DN.(koncovej fázeobličkovéchoroba)náchylnosť. Môže byť zahrnutý do zoznamu génov molekulárnej citlivosti, ktoré môžu podporovať stratifikáciu rizika pacienta a včasné preventívne merania. Je však potrebné poznamenať, že nebolo možné definitívne vylúčiť dôsledok iných potenciálnych faktorov, ako je vystavenie rôznym environmentálnym faktorom (ako je typ liečby alebo výživy) a ďalším genetickým faktorom. Zaručujú sa ďalšie štúdie s väčšou veľkosťou vzorky a dlhodobé následné replikačné štúdie, najmä v populáciách s rôznymi etnikami. Na potvrdenie úlohy miR-499a v etiopatológii ESRD spojenej s DN sú potrebné aj funkčné štúdie.

Cistanche dokáže liečiťobličkovéchoroba

Referencie:

1. Sattar A, Argyropoulos C, Weissfeld L, Younas N, Fried L, Kellum JA a Unruh M: Úmrtnosť zo všetkých príčin a špecifická pre príčinu spojená s diabetom u prevalentných hemodialyzovaných pacientov. BMC Nephrol 13: 130, 2012.
2. Al-Sayyari AA a Shaheen FA: Konečné štádium chronického ochoreniaobličkychoroba v Saudskej Arábii. Rýchlo sa meniaca scéna. Saudi Med J 32: 339-346, 2011.
3. Mooyaart AL: Genetické asociácie pri diabetickej nefropatii. Clin Exp Nephrol 18: 197-200, 2014.
4. Lu Z, Liu N a Wang F: Epigenetické predpisy pri diabetickej nefropatii. J Diabetes Res 2017: 7805058, 2017.
5. Schena FP, Serino G a Sallustio F: MicroRNAs vobličkychoroby: nové sľubné biomarkery na diagnostiku a monitorovanie. Transplantácia nefrolového čísla 29: 755-763, 2014.
6. Felekkis K, Touvana E, Stefanou Ch a Deltas C: MicroRNAs: Novo opísaná trieda kódovaných molekúl, ktoré hrajú úlohu v zdraví a chorobe. Hippokratia 14: 236-240, 2010.
7. Mashayekhi S, Saeidi Saedi H, Salehi Z, Soltanipour S a Mirzajani E: Účinky polymorfizmov miR-27a, miR-196a2 a miR-146a na riziko rakoviny prsníka. Br J Biomed Sci 75: 76-81, 2018.

8. Toraih EA, Hussein MH, Al Ageeli E, Riad E, Abdallah NB, Helal GM a Fawzy MS: Štruktúra a funkčný vplyv variantu oblasti semena v génovej rodine MIR‑499 pri bronchiálnej astme. Respir Res 18: 169, 2017.

9. Fawzy MS, Toraih EA, Hamed EO, Hussein MH a Ismail HM: Asociácia expresie MIR-499a a variantu oblasti semena (rs3746444) s kardiovaskulárnym ochorením u egyptských pacientov. Acta Cardiol 73: 131-140, 2018.

10. Wang WJ, Cai GY a Chen XM: Bunková senescencia, sekrečný fenotyp súvisiaci so starnutím a chronickáobličkychoroba. Oncotarget 8: 64520-64533, 2017.
11. Sluijter JP, van Mil A, van Vliet P, Metz CH, Liu J, Doevendans PA a Goumans MJ: MicroRNA-1 a -499 regulujú diferenciáciu a proliferáciu v ľudských progenitorových bunkách kardiomyocytov. Arterioscler Thromb Vasc Biol 30: 859‑868, 2010.
12. Ling TY, Wang XL, Chai Q, Lau TW, Koestler CM, Park SJ, Daly RC, Greason KL, Jen J, Wu LQ a kol.: Regulácia SK3 kanála potenciálnou úlohou mikroRNA-499 pri fibrilácii predsiení . Srdcový rytmus 10: 1001-1009, 2013.
13. Xu Z, Han Y, Liu J, Jiang F, Hu H, Wang Y, Liu Q, Gong Y a Li X: MiR-135b-5p a MiR-499a-3p priamo podporujú bunkovú proliferáciu a migráciu pri ateroskleróze zacielenie na MEF2C. Sci Rep 5: 12276, 2015.
14. Konzorcium génovej ontológie: Zdroj génovej ontológie: Obohacovanie zlatej bane. Nucleic Acids Res 49: D325-D334, 2021.
15. Wang L, Zhang N, Pan HP, Wang Z a Cao ZY: MiR-499-5p prispieva k inzulínovej rezistencii pečene potlačením PTEN. Cell Physiol Biochem 36: 2357-2365, 2015.
16. Toraih EA, Ismail NM, Toraih AA, Hussein MH a Fawzy MS: Variant prekurzora miR-499a, ale nie miR-196a2, súvisí s citlivosťou na reumatoidnú artritídu v egyptskej populácii. Mol Diagn Ther 20: 279-295, 2016.
17. Toraih EA, Fawz MS, Elgazzaz MG, Hussein MH, Shehata RH a Daoud HG: Kombinované genotypové analýzy prekurzorových miRNA196a2 a 499a variantov s citlivosťou na rakovinu pečene a obličiek – predbežná štúdia. Asian Pac J Cancer Predchádzajúca 17: 3369-3375, 2016.

18. Fawzy MS, Abu AlSel BT, Al Ageeli E, Al-Qahtani SA, Abdel-Daim MM a Toraih EA: Profily expresie dlhých nekódujúcich RNA MALAT1 a microRNA-499a u diabetických pacientov s ESRD podstupujúcich dialýzu: Predbežný krížový prierezová analýza. Arch Physiol Biochem 126: 172-182, 2020.

19. Ghani AA, Al Waheeb S, Al Sahow A a Hussain N: Renálna biopsia u pacientov s diabetes mellitus 2. typu: Indikácie a povaha lézií. Ann Saudi Med 29: 450-453, 2009.

20. Nah EH, Cho S, Kim S a Cho HI: Porovnanie pomeru albumínu ku kreatinínu v moči (ACR) medzi ACR strip testom a kvantitatívnym testom pri prediabete a cukrovke. Ann Lab Med 37: 28-33, 2017.
21. Fawzy MS a Beladi FIA: Asociácia expresie cirkulujúceho vitamínu D, VDBP a receptora vitamínu D so závažnosťou diabetickej nefropatie v skupine pacientov s diabetes mellitus 2. typu v Saudskej Arábii. Clin Lab 64: 1623-1633, 2018.
22. Livak KJ a Schmittgen TD: Analýza údajov relatívnej génovej expresie pomocou kvantitatívnej PCR v reálnom čase a metódy 2(‑Delta Delta C(T)). Methods 25: 402-408, 2001.
23. Shastry BS: SNP: Vplyv na funkciu génu a fenotyp. Methods Mol Biol 578: 3-22, 2009.
24. Hoffman AE, Zheng T, Yi C, Leader D, Weidhaas J, Slack F, Zhang Y, Paranjape T a Zhu Y: MicroRNA miR-196a-2 a rakovina prsníka: genetická a epigenetická asociačná štúdia a funkčná analýza. Cancer Res 69: 5970-5977, 2009.
25. Misra MK, Pandey SK, Kapoor R, Sharma RK a Agrawal S: Genetické varianty génov súvisiacich s MicroRNA v náchylnosti a prognóze konečného štádiaobličkovéchorobaa výsledok renálneho aloštepu u severných Indiánov. Pharmacogenet Genomics 24: 442-450, 2014.
26. Kato M, Yuan H, Xu ZG, Lanting L, Li SL, Wang M, Hu MC, Reddy MA a Natarajan R: Úloha Akt/FoxO3a dráhy TGF-beta1-sprostredkovaná dysfunkcia mezangiálnych buniek: Nový mechanizmus súvisiaci k cukrovkeobličkychoroba. J Am Soc Nephrol 17: 3325-3335, 2006.
27. Qin G, Zhou Y, Guo F, Ren L, Wu L, Zhang Y, Ma X a Wang Q: Nadmerná expresia FoxO1 zlepšuje dysfunkciu mezangiálnych buniek u samcov diabetických potkanov. Mol Endocrinol 29: 1080-1091, 2015.
28. Chang AS, Hathaway CK, Smithies O a Kakoki M: Transformujúci rastový faktor- 1 a diabetická nefropatia. Am J Physiol Renal Physiol 310: F689-F696, 2016.
29. Akhtar S, Yousif MH, Dhaunsi GS, Sarkhouh F, Chandrasekhar B, Attur S a Benter IF: Aktivácia ErbB2 a downstream signalizácie prostredníctvom Rho kináz a ERK1/2 prispieva k vaskulárnej dysfunkcii vyvolanej cukrovkou. PLoS One 8: e67813, 2013.

30. Omote K, Gohda T, Murakoshi M, Sasaki Y, Kazuno S, Fujimura T, Ishizaka M, Sonoda Y a Tomino Y: Úloha dráhy TNF v progresii diabetickej nefropatie u myší KK‑A(y). Am J Physiol Renal Physiol 306: F1335-F1347, 2014.

31. Al-Lamki RS a Mayadas TN: TNF receptory: Signálne dráhy a príspevok k renálnej dysfunkcii.ObličkyInt 87: 281-296, 2015.
32. Gödel M, Hartleben B, Herbach N, Liu S, Zschiedrich S, Lu S, Debreczeni‑Mór A, Lindenmeyer MT, Rastaldi MP, Hartleben G, et al: Úloha mTOR vo funkcii podocytov a diabetickej nefropatii u ľudí a myší . J Clin Invest 121: 2197-2209, 2011.

33. Ziyadeh FN, Hoffman BB, Han DC, Iglesias‑De La Cruz MC, Hong SW, Isono M, Chen S, McGowan TA a Sharma K: Dlhodobá prevencia renálnej insuficiencie, nadmernej expresie matrixového génu a glomerulárnej mezangiálnej matrix expanzia liečbou monoklonálnou protilátkou proti transformujúcemu rastovému faktoru-beta u db/db diabetických myší. Proc Natl Acad Sci USA 97: 8015-8020, 2000.

34. Mori H, Inoki K, Masutani K, Wakabayashi Y, Komai K, Nakagawa R, Guan KL a Yoshimura A: Dráha mTOR je vysoko aktivovaná pri diabetickej nefropatii a rapamycín má silný terapeutický potenciál. Biochem Biophys Res Commun 384: 471-475, 2009.
35. Ciccacci C, Latini A, Greco C, Politi C, D'Amato C, Lauro D, Novelli G, Borgiani P a Spallone V: Asociácia medzi polymorfizmom MIR499A a diabetickou neuropatiou pri diabete 2. typu. J Diabetes Complications 32: 11-17, 2018.
36. Forbes JM a Thorburn DR: Mitochondriálna dysfunkcia u diabetikaobličkychoroba. Nat Rev Nephrol 14: 291-312, 2018.
37. Flemming NB, Gallo LA a Forbes JM: Mitochondriálna dysfunkcia a signalizácia u diabetikovobličkychoroba: Oxidačný stres a ďalšie. Semin Nephrol 38: 101-110, 2018.